尊龙凯时推出的猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒(实时荧光PCR法)是一款高效的病毒检测工具,广泛用于猪蓝耳病病毒的定性检测,具备重要的诊断和疗效评估指导意义。
产品信息
产品名称:猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒(实时荧光PCR法)
英文名称:Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)
包装规格:50T/盒
原理
本试剂盒基于实时荧光PCR原理,专门设计了针对猪蓝耳病病毒高度保守区域的特异性引物和探针。在检测到猪蓝耳病病毒基因组模板时,PCR反应会释放相应的荧光信号,从而实现定性分析。
组成部分
试剂盒内包含以下成分:
- PRRSV RT-PCR反应液 875 μL × 1管
- PRRSV混合酶液 125 μL × 1管
- PRRSV阳性对照 40 μL × 1管
- PRRSV阴性对照 40 μL × 1管
- 使用说明书 1份
特别说明:阴性对照为灭菌纯水,阳性对照为含猪蓝耳靶基因的质粒。
储存条件及有效期
试剂盒应避光存放于-20℃以下,并避免反复冻融,有效期为12个月。
适用仪器
本试剂盒适用于多通道实时荧光定量PCR仪,包括ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480等。
样本要求
样本种类包括血液、血清、肺脏、淋巴结和脾脏样品,需要避免交叉污染。样本在收集后,若不能立即检测,可存放于2~8℃冷藏,长期保存需在-80℃以下冻存。
检验方法及步骤
1. 试剂准备
从冰箱中取出试剂,充分融化混匀,并瞬时离心去除管壁残留液体。计算反应所需试剂量按照以下反应体系配置。
2. 样本准备
使用RNA提取试剂盒提取待测样本的RNA,操作应遵循产品说明书。
3. 加样
在PCR反应管中分别加入5μL待测样本RNA,并确保终体积为25μL/管。阳性和阴性对照亦需按比例加入。
4. PCR扩增
将准备好的PCR反应管放入实时荧光定量PCR仪,设置相关参数以进行PCR扩增。
结果判定
检测结果的参考值包括阳性对照的扩增曲线、阴性对照的Ct值等,标本结果分为阳性、可疑和阴性三类。
注意事项
使用本试剂盒需遵循相关实验室管理规范,确保操作过程中的样本处理防止RNA降解和交叉污染,检测结束后需对工作台及器具进行清洁和消毒。
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