树突状细胞(Dendritic cells, DCs)在自然识别病原体和随后的适应性免疫反应中发挥着至关重要的作用。尽管DCs广泛存在于多种体内组织中,但其数量稀少,难以满足科学研究和临床治疗的需求。因此,研究人员在不断探索各种方法以体外培养和扩增这些细胞。
BMDCs的诱导方法
对于小鼠,培养骨髓来源的树突状细胞(Bone Marrow-Derived Dendritic Cells, BMDCs)是最常用的方法。这一过程需要在粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-4(IL-4)等细胞因子的培养环境中,诱导骨髓细胞进行分化。BMDCs在研究免疫反应、抗原呈递和细胞免疫调控领域中,都是重要的研究工具。
相关研究成果
上海交通大学药学院沈琦研究团队在《Advanced Functional Materials》上发表了一项研究,标题为“Self-adjuvanting bacteria hydrogel for SHP1 checkpoint inhibition in tumor-draining lymph nodes to enhance cancer immunotherapy”。该研究开发的AAM水凝胶系统结合多种机制,旨在通过DCs的免疫活性,增强肿瘤免疫疗法的效果。在BMDCs的诱导中,使用了重组小鼠GM-CSF和小鼠IL-4,研究结果显示,MHV通过甘露糖受体靶向BMDCs,并诱导肿瘤细胞的免疫原性细胞死亡(ICD),进而激活BMDCs。
此外,苏州大学FUNSOM陈倩团队在《Advanced Materials》上在线发表了题为“AMinimalist Pathogen-Like Sugar Nanovaccine for Enhanced Cancer Immunotherapy”的研究论文。他们同样使用重组小鼠GM-CSF和IL-4诱导骨髓源细胞分化为BMDCs,并进行了疫苗免疫激活和抗原特异性T细胞增殖的体外验证。
实验材料与步骤
为了诱导BMDCs,通常需要使用6-8周龄的C57BL/6小鼠,配合磷酸盐缓冲液(PBS)、细胞培养基(如RPMI1640,并添加10%胎牛血清及相应的抗生素)、离心管、细胞过滤器等实验材料。
实验步骤包括:选择健康的小鼠,颈椎脱臼后消毒;提取股骨和胫骨,冲洗以获得骨髓细胞;经过细胞过滤后,离心并处理细胞;将细胞重悬于含GM-CSF和IL-4的完全培养基中,以适当细胞密度培养;在特定时间点观察并确认CD11c阳性细胞的比例,以判断DCs的成熟程度。
常见问题解答
尊龙凯时品牌关注用户在BMDCs诱导过程中的疑问,例如如何判断树突状细胞是否成熟,如何提高诱导效率等。成熟的DCs可以通过流式细胞术检测表面标志物来确认,且保证培养条件的适宜性以及细胞因子的稳定性是提高BMDCs诱导效率的关键。
对GM-CSF和IL-4的定期补充和合适浓度的维护,将有效促进细胞的生长与分化,确保诱导过程的成功。因此,任何在实验过程中遇到的问题都应及时调整,保障最终实验结果的可靠性。